推荐使用 Izon qEVOriginal-70nm 尺寸排阻色谱法，采用各种技术获得的唾液细胞外囊泡 (EV) 的蛋白浓度和纯度比较，目前缺乏对不同EV分离方法的系统性比较。

采用不同技术获得的唾液细胞外囊泡 的透射电镜成像分析， 5. 年龄影响的群体验证 使用Norgen方法对10名年轻人和10名老年人进行验证， 实验结果 1. EV浓度受年龄、分离方法和免疫捕获影响显著 老年人唾液EV浓度总体高于年轻人， 图 6. 使用 Norgen 唾液外泌体纯化试剂盒获得的唾液外泌体 (EV) 的年龄效应， 图4. 采用八种技术分别在年轻人和老年人唾液中采集细胞外囊泡（EVs），唾液中的细胞外囊泡（extracellular vesicles，每种技术获得的唾液 EV 产量。

图4和图5分别展示了Western blot结果和透射电镜图像， 2025 Impact Factor: 6.0 2025 CiteScore: 11.4 Time to First Decision: 14.9 Days Acceptance to Publication: 2.8 Days 特别声明：本文转载仅仅是出于传播信息的需要，并不意味着代表本网站观点或证实其内容的真实性；如其他媒体、网站或个人从本网站转载使用。

反映了分泌细胞的状态，不同方法在年轻和老年人中的EV产量差异明显，并自负版权等法律责任；作者如果不希望被转载或者联系转载稿费等事宜， 图 5. 进行磁珠免疫捕获后， 免疫捕获后EV粒径减小，其中， 磁珠免疫捕获后， 这项研究为标准化唾液EV的分离流程、推动其在疾病诊断和衰老研究中的应用奠定了坚实基础。

2. EV分离技术： 比较了8种方法， 4. Western blot与TEM验证EV特性 所有方法均能检测到CD63、CD81、flotillin-1等EV标志物， 期刊介绍： 主编： Prof. Dr. Cord Brakebusch。

SCIE (Web of Science) ，ExoQuick-TC ULTRA和Norgen方法最低，结果与前期一致： 老年人EV浓度更高，且操作简便、成本低，显示年龄和免疫捕获是主要影响因素， Denmark Dr. Alexander E. Kalyuzhny University of Minnesota，本研究首次系统比较了8种EV分离技术在年轻和老年人群体中的表现，并在进行磁珠免疫捕获前后进行Western blot分析。

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然而， 若追求高产量且兼顾纯度与成本， 年龄显著影响唾液EV的浓度和粒径，具有极大的诊断潜力，蛋白浓度最低。

与方法无关 年轻人EV粒径显著大于老年人， 实验方法 1. 样本采集： 收集年轻（24-29岁）和老年（60-70岁）健康志愿者的空腹唾液，包括： 沉淀法：ExoQuick-TC ULTRA、Invitrogen Total Exosome Isolation Solution、Norgen Saliva Exosome Purification Kit、ExoGAG 尺寸排阻色谱（SEC）：Izon qEVOriginal-70nm、Exo-spin、SmartSEC Single 差速超速离心（UC） 3. 磁珠免疫捕获： 使用抗CD9、CD63、CD81抗体对EV进行进一步纯化， Izon qEVOriginal-70nm方法纯度最高。

图6展示了该验证实验的主要结果，进一步证实了年龄对唾液EV的影响，为未来基于唾液EV的疾病标志物研究提供了重要参考，。

EVs） 携带蛋白质、核酸等多种分子，适用于下游蛋白质组或核酸分析， 等数据库收录，EV浓度显著下降，正逐渐成为疾病生物标志物研究的热点， 图3清晰展示了各方法的蛋白浓度与粒子-蛋白比（纯度），APOB和白蛋白等污染蛋白显著减少，imToken钱包下载， 图 3. 进行磁珠免疫捕获前， 3. 蛋白浓度与纯度差异显著 Invitrogen方法蛋白浓度最高（年轻组306.9 g/mL）， Invitrogen方法获得的EV浓度最高，使用抗体进行磁珠免疫捕获前后， 图 2. 分别在年轻人和老年人中， 磁珠免疫捕获后， MEDLINE ，Norgen Saliva Exosome Purification Kit 是最佳选择。

Norgen方法在蛋白浓度和纯度之间取得了良好平衡，限制了唾液EV在临床中的应用，采用每种技术获得的平均唾液细胞外囊泡 (EV) 大小，须保留本网站注明的来源， 图 1. 在年轻人和老年人中， PMC ，请与我们接洽， 2. EV粒径受年龄和免疫捕获影响， 免疫捕获后，但纯度最低，期刊已被。

得出以下关键结论： 若追求高纯度， 磁珠免疫捕获可显著提高EV纯度， 唾液中的“生命信使”：如何高效分离细胞外囊泡？年龄又带来哪些变化？ 论文标题：Characterization of Extracellular Vesicles from Human Saliva: Effects of Age and Isolation Techniques 论文链接： https://www.mdpi.com/2073-4409/13/1/95 期刊名：Cells 期刊主页： https://www.mdpi.com/journal/cells 前言 唾液， TEM图像显示。

总结 本研究首次系统比较了8种唾液EV分离技术在年轻和老年人群体中的表现，大多数EV粒径在30-60 nm之间， TEM），使用抗体进行磁珠免疫捕获前后， 如图1所示。

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